Риск туберкулеза (ТБ) у лиц с латентной туберкулезной инфекцией (ЛТИ)
В недавних исследованиях показано, что туберкулезная инфекция (ТИ) человека существует в пределах непрерывного спектра метаболической бактериальной активности и антагонистических иммунологических реакций от латентной инфекции до активного заболевания. Распознавание прогрессирования ТИ, а также разделение латентного и активного ТБ по спектру клинических проявлений не представляется возможным даже с учетом известных факторов риска.
Диагностические тесты для оценки напряженности специфического иммунитета
Очевидно, что проводимых общественным здравоохранением мер недостаточно, чтобы положить конец эпидемии ТБ; необходимо внедрение новых диагностических инструментов. Таким инструментом может стать метод количественной оценки кольцевых участков ДНК, побочных продуктов реаранжировки генов антиген-распознающих рецепторов Т-клеток — TREC (T-cell receptor excision circle) и В-клеток — KREC (kappa-deleting recombination excision circle), отражающий функциональное состояние клеточного иммунитета в реальном времени.
Специалисты Московского областного клинического противотуберкулезного диспансера провели исследование оценки значений TREC и KREC у детей раннего и дошкольного возраста из группы высокого риска ТБ в качестве перспективного маркера активности ТИ.
Материалы и методы исследования TREC и KREC в качестве перспективного маркера активности ТИ
На базе ГБУЗ МО «Московский областной клинический противотуберкулезный диспансер» проведено поперечное исследование с января по сентябрь 2022 г. Группу наблюдения составили 87 детей в возрасте 1–7 лет, из них 13 (14,9%) в возрасте 1–3 лет и 74 (85,1%) — 4–7 лет, обследованы 53 мальчика (60,9%) и 34 девочки (39,1%). Были сформированы 3 группы: 1-я (n = 27) — с установленным диагнозом туберкулеза (ТБ); 2-я (n = 34) — дети с наличием туберкулезной инфекции по результатам туберкулинодиагностики и без признаков локального специфического процесса (ТИ); 3-я (n = 26) — дети без признаков ТИ по результатам специфических кожных проб и без признаков ТБ (условно здоровые). У всех детей помимо методов, позволяющих подтвердить или исключить ТБ, и методов специфической иммунодиагностики провели молекулярно-генетическое исследование: выделение ДНК из сухого пятна крови и количественное определение TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени в значениях копий TREC и KREC на 105 клеток. Учитывая, что часть детей из 1-й группы получали противотуберкулезную терапию (ПТТ), были выделены 2 подгруппы: 1-я (n = 19) — больные ТБ до ПТТ и 2-я (n = 8) — ранее получившие ПТТ для уточнения влияния ПТТ на результаты значений ДНК TREC и KREC.
Результаты исследования TREC и KREC в качестве перспективного маркера активности ТИ
На первом этапе исследования были установлены референсные значения TREC и KREC при выделении ДНК из сухого пятна крови детей раннего и дошкольного возраста из 3-й группы, условно здоровых: для TREC нижняя граница соответствовала 175,4, верхняя — 763,9, для KREC: нижняя граница на уровне 537,8, верхняя — 2173,1.
На втором этапе проводили сравнительную оценку значений ДНК TREC и KREC у детей в трех исследуемых группах. Во 2-й группе детей (ТИ), не получающих ПТТ, не было статистически значимых отличий с показателями у детей 3-й группы. Однако, сравнивая эти результаты с результатами детей из 1-й группы, больных ТБ, установили статистически значимые различия (p < 0,01).
При анализе результатов TREC/105 больных детей из группы 1 с показателями детей из 3-й группы, установили статистически значимые различия (p < 0,01). У больных детей 2-й подгруппы (ТБ), получавших ПТТ (n = 8), отметили значительное снижение показателей, которые статистически значимо отличались от уровня TREC/105 и KREC/105 PBMC до лечения (p < 0,01).
По итогам дисперсионного анализа* выделены признаки, вносящие значимый вклад в оценку ТИ, которые распределились по уровню статистической значимости: ПТТ (F = 42,001, р < 0,001), положительная или отрицательная реакция на аллерген туберкулезный рекомбинантный при проведении внутрикожного теста (Диаскинтест®) (F = 39,394, р < 0,001), высокий уровень TREC в крови (F = 12,707, р < 0,001), наличие реакции на туберкулин (проба Манту) (F = 10,625, р < 0,001) и уровень KREC (F = 3,182, р = 0,039).
* F-тест, который играет важную роль в дисперсионном анализе — гипотеза о том, что средние значения для данного набора нормально распределенных совокупностей, все из которых имеют одинаковое стандартное отклонение, равны.
Выводы на основании результатов исследования TREC и KREC в качестве перспективного маркера активности ТИ
Авторы обращают внимание, что до настоящего времени исследований, направленных на оценку уровня ДНК TREC и KREC у детей раннего и дошкольного возраста при наличии ТИ, не проводилось.
В заключение авторы делают вывод, что результаты исследования позволяют рассматривать определение в первую очередь концентрации TREC в качестве персонализированного предиктора риска прогрессирования ТИ у детей раннего и дошкольного возраста.